Температура плавления праймеров

Расчёт Tm праймеров, шпилек и димеров для ПЦР.

Фьюжн полимераза Клонинг Фасилити
Фьюжн полимераза Клонинг Фасилити
Taq / свои условия реакции

Введите праймеры, 5′ → 3′

Способ ввода:

Вторичные структуры

Расчёт Tm и взаимодействий праймеров

Tm участка отжига: SantaLucia / Owczarzy с учётом солей и dNTP. Шпильки и димеры: Primer3 2.6.1, включая 5′-хвосты.

Границы расчёта

Tₐ — ориентир для температурного градиента. Расчёт не проверяет специфичность на геноме и не предсказывает выход ПЦР.

Шпильки праймеров длиннее 60 нт и димеры двух таких праймеров получают отдельную эвристическую оценку; в ней не учитывается связывание Mg²⁺ с dNTP.

Метка «3′» в смеси обозначает комплементарный конец от 3 оснований и возможность его первого удлинения. Последующие циклы, удлинение шпилек, терминальные несовпадения и коррекция полимеразой не моделируются. Отсутствие найденных структур не исключает артефакты.