IdeS протеаза

1. Описание

Протеаза IdeS — это высокоспецифичная цистеиновая гидролаза. Фермент получен в штамме E. coli, несущем ген протеазы IdeS Streptococcus pyogenes.

2. Протокол использования

СТАНДАРТНЫЙ ГИДРОЛИЗ IgG

1. Смешайте иммуноглобулин G и 10X реакционный буфер.

2. Рекомендуемая концентрация субстрата в реакции — 0.5 мкг/мкл.

3. Добавьте протеазу IdeS из расчета 1 ед.на 1 мкг IgG.

4. Инкубируйте смесь 30–60 минут при 37°C.

3. Советы от R&D отдела

  • Фермент сохраняет высокую активность в PBS, Tris и HEPES (pH 6.0–8.0). Оптимальное значение pH — 6.6.
  • Продукт не работает на мышиных IgG1 и IgG2b. Для мышиных IgG2a и IgG3 мы рекомендуем увеличить дозировку фермента в 5–10 раз.
  • Избегайте многократных циклов замораживания-размораживания для реакционного буфера (рекомендуется аликвотирование)
  • IgG крысы, свиньи, коровы и козы не расщепляются данным ферментом.

4. Спецификация набора

6 000 ед.
1 пробирка: 40 мкл фермента в буфере для хранения
1 пробирка : 1 мл 10х реакционного буфера
30 000 ед.
1 пробирка: 200 мкл фермента в буфере для хранения
1 пробирка : 1 мл 10х реакционного буфера

5. Характеристики

Активность >150 ед./мкл.
Инактивация Фермент удаляется методами аффинной очистки.

6. Состав растворов

Буфер для хранения: 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 150 mM имидазол, 2.5 mM TCEP, 50% глицерин
10× Реакционный буфер: 500 mM Tris-HCl (pH 6.6), 1.5 M NaCl.

7. Ключевые определения

За одну единицу активности принято количество фермента, которое расщепляет 1 мкг рекомбинантного иммуноглобулина G за 30 минут при 37°C в реакционном буфере.

8. Условия хранения

Срок годности 2 года. Хранить при температуре -20°C

9. Документация и сертификаты